专肽生物_定制多肽合成服务_多肽合成定制服务_多肽合成厂家_多肽合成公司

GALA是一种合成的生物模仿肽，它来源于GALA家族，这些肽因其在酸性环境中能够转变为α-螺旋结构并促进膜融合而被研究。GALA肽的序列为WEAALAEALAEALAEHLAEALAEALEALAA，包含重复的Glu-Ala-Leu-Ala片段，这种结构使其在中性条件下水溶性良好，而在酸性环境下能够插入细胞膜并促进膜的融合。

【GALA应用】

       GALA是一种pH敏感的两亲性多肽，它在药物递送系统中的作用主要体现在促进药物载体的细胞内输送效率。在中性pH条件下，GALA肽呈无规则卷曲结构，而在酸性环境中（如溶酶体内的pH约为5），GALA肽的谷氨酸残基会被质子化，导致肽链转变为α-螺旋结构，这种结构有助于肽插入细胞膜，促进药物载体与细胞膜的融合，从而实现药物的高效释放。

        GALA可以用于提高药物递送系统的效率，特别是在促进药物从内体逃逸到细胞质中方面显示出潜力。例如，GALA肽修饰的脂质体制剂能够通过网格蛋白介导的途径被内化到肺内皮细胞中，并通过转胞吞作用到达其他细胞，显示出其在肺部药物递送中的应用前景。此外，GALA肽还被用于构建Cytosolic DNA Sensor (CDS)激动剂，通过促进长单链DNA (lssDNA) 从内体到胞质溶胶的细胞内转运，有效刺激树突状细胞中的CDS-STING通路，这对于癌症治疗和疫苗佐剂的开发具有重要意义。

【GALA优势】

        GALA是一种酸敏感多肽，它在药物递送方面具有独特的优势。在微酸性环境下，GALA肽能够由亲水的无规卷曲构象转变为两亲性的α-螺旋结构，有助于该多肽插入到脂质双层的疏水区，从而促进脂质体与细胞膜的融合，协助负载的药物或基因释放到细胞内部。这种特性使得GALA肽在肿瘤治疗中尤其有用，因为肿瘤微环境通常是酸性的。此外，GALA肽具有良好的生物相容性及可降解性，这些特点在纳米药物递送系统的研究领域中非常有价值。

Francois, N. et al. Biophys. J. 76, 2121 (1999);

Li, W. et al. Adv. Drug Del. Rev.56, 967 (2004).

多肽H2N-Trp-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-His-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Glu-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH的合成步骤：

1、合成CTC树脂：称取2.75g CTC Resin（如初始取代度约为1.03mmol/g）和3.4mmol Fmoc-Ala-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入8.5mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到  Fmoc-Ala-CTC Resin。结构图如下：

2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Ala-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取8.5mmol Fmoc-Ala-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入17.0mmol DIPEA，8.07mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ala-Ala-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Trp(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Trp(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin，结构如下：

5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Trp-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-His-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Glu-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

7、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。

以上所有内容，为专肽生物原创内容，请勿发布到其他网站上。