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GALA是一种合成的生物模仿肽，它来源于GALA家族，这些肽因其在酸性环境中能够转变为α-螺旋结构并促进膜融合而被研究。GALA肽的序列为WEAALAEALAEALAEHLAEALAEALEALAA，包含重复的Glu-Ala-Leu-Ala片段，这种结构使其在中性条件下水溶性良好，而在酸性环境下能够插入细胞膜并促进膜的融合。

【GALA应用】

       GALA是一种pH敏感的两亲性多肽，它在药物递送系统中的作用主要体现在促进药物载体的细胞内输送效率。在中性pH条件下，GALA肽呈无规则卷曲结构，而在酸性环境中（如溶酶体内的pH约为5），GALA肽的谷氨酸残基会被质子化，导致肽链转变为α-螺旋结构，这种结构有助于肽插入细胞膜，促进药物载体与细胞膜的融合，从而实现药物的高效释放。

        GALA可以用于提高药物递送系统的效率，特别是在促进药物从内体逃逸到细胞质中方面显示出潜力。例如，GALA肽修饰的脂质体制剂能够通过网格蛋白介导的途径被内化到肺内皮细胞中，并通过转胞吞作用到达其他细胞，显示出其在肺部药物递送中的应用前景。此外，GALA肽还被用于构建Cytosolic DNA Sensor (CDS)激动剂，通过促进长单链DNA (lssDNA) 从内体到胞质溶胶的细胞内转运，有效刺激树突状细胞中的CDS-STING通路，这对于癌症治疗和疫苗佐剂的开发具有重要意义。

【GALA优势】

        GALA是一种酸敏感多肽，它在药物递送方面具有独特的优势。在微酸性环境下，GALA肽能够由亲水的无规卷曲构象转变为两亲性的α-螺旋结构，有助于该多肽插入到脂质双层的疏水区，从而促进脂质体与细胞膜的融合，协助负载的药物或基因释放到细胞内部。这种特性使得GALA肽在肿瘤治疗中尤其有用，因为肿瘤微环境通常是酸性的。此外，GALA肽具有良好的生物相容性及可降解性，这些特点在纳米药物递送系统的研究领域中非常有价值。

GALA 是一种 30 个氨基酸的合成多肽，具有谷氨酸‑丙氨酸‑亮氨酸‑丙氨酸（EALA）重复序列。它还含有组氨酸与色氨酸残基作为光谱探针。设计该多肽旨在探究病毒融合蛋白序列如何与膜相互作用。用于研究螺旋长度、疏水性与疏水矩对离子通道形成、结构与功能的重要性。GALA 的膜相互作用特性已被广泛记录。对细胞毒性多肽类似物的研究阐明了多肽电荷的重要性以及特定氨基酸或氨基酸排列在这些毒素的构象、膜结合亲和力与成孔能力中的作用。

GALA is a 30 amino acid synthetic peptide with a glutamic acid-alanine-leucine-alanine (EALA) repeat. It also contains a histidine and tryptophan residue as spectroscopic probes. This peptide was designed to explore how viral fusion protein sequences interact with membranes. It was used to study the importance of the helix length, hydrophobicity, and hydrophobic moment on the formation, structure, and function of ion channels. The membrane-interacting properties of GALA have been extensively documented. Investigations with analogs of cytotoxic peptides clarify the importance of peptide charge and the role of particular amino acids or arrays of amino acids in the conformation, membrane-binding affinity, and pore-forming abilities of these toxins.

GALA 是一种有生物活性的肽。(GALA 是一种 pH 敏感的融合肽，是加速这一步骤以增强所需蛋白质表达的有前途的方法。) GALA 是一种由 30 个氨基酸组成的 pH 响应型两亲肽，是肺内皮靶向配体。GALA 能在 pH 5.0 的酸性环境下发生从无规卷曲到 α-螺旋的构象转变，从而诱导内体膜去稳定化和融合。GALA 介导修饰后的脂质体通过网格蛋白依赖的内吞及转胞吞作用穿越肺内皮细胞，并在静脉注射后特异性蓄积于肺部。GALA 能显著促进外泌体、质粒及脂质体所载货物的胞质释放，有效提升基因转染效率并驱动功能性大分子 (如 siRNA) 在肺泡上皮细胞中的基因敲低 (有效浓度下无显著细胞毒性)。GALA 是肺癌转移 (如黑色素瘤肺转移) 及肺部靶向给药系统研究的重要工具。 体外研究 GALA/Chol-LPs (11-55 nmole lipids；2-3 h) 主要通过网格蛋白介导的内吞途径被人肺微血管内皮细胞 (HMVEC-L) 内化，在孵育 3 h 后，14 μM Chlorpromazine (HY-12708) 可使其摄取量被抑制 52%。 GALA peptide (0.5-2 μM；37 °C；6 h) 与不表达 CD63-GFP 的外泌体及 Lipofectamine LTX 联合处理时，在 HeLa 细胞中表现出增强的细胞摄取效率与胞质分布水平，其中 2 μM GALA 可使细胞摄取水平提升约 12 倍。 GALA peptide (2-10 μM；37 °C；6 h) 与 Lipofectamine LTX 联合处理时，在 2 μM 浓度下可使 HeLa 细胞中表达 CD63-GFP 的外泌体的细胞摄取量提升约 1.5 倍，而 10 μM 的 GALA peptide 会降低摄取效率。 GALA peptide (0.5-2 μM；37 °C；6 h) 与 Texas red (HY-101878) 标记的葡聚糖包裹外泌体及 Lipofectamine LTX 联用时，可在 HeLa 细胞中驱动葡聚糖的高效胞质释放，其中 2 μM GALA 可在约 60% 的细胞中诱导胞质葡聚糖信号。 GALA peptide (2 μM；37 °C；24 h) 与载皂草素的外泌体及 Lipofectamine LTX 联合处理时，可诱导 HeLa 细胞发生约 98% 的死亡，并通过增强皂草素的胞质递送发挥强细胞毒性。 GALA (0.1-5.0 μM；12-48 h) 以浓度依赖的方式增强 Lipofectin 介导的 COS-7 细胞荧光素酶转染效果，其中 0.1 μM GALA 处理 48 h 后可使转染效率提升 5 倍，且在所有检测时间点 (12、24、48 h) 均可使转染效率提升约 3.5 倍。 GALA (0.1-5.0 μM；48 h) 可增强 Lipofectamine 2000 在 COS-7 细胞中介导的荧光素酶转染效果，其中 0.1 μM GALA 处理 48 h 后可使转染效率提升 2 倍。 GALA (0.1 μM; 5 h) 不会改变 Lipofectin 转染的 COS-7 细胞中罗丹明标记质粒 DNA 的细胞定位，但可与质粒发生囊泡共定位并呈现弥散的胞质染色。 GALA (0.1 μM；5 h) 可降低经阳离子脂质体转染的 COS-7 细胞中罗丹明标记质粒 DNA 的细胞摄取量，其中使用 Lipofectin 时的摄取量降幅最大 (约 19%) 体内研究 GALA-modified liposomes (26.4 nmol lipids/kg；静脉注射；单剂量) 可在小鼠肺内皮细胞中大量蓄积，超过 70% 的内皮细胞会摄取该颗粒，且其可穿过内皮屏障，抵达约 30%-35% 的 I 型肺泡上皮细胞。 GALA/Chol-MEND 和 GALA/PEG2000-MEND (1.5 mg siRNA/kg；静脉注射；单剂量) 在小鼠 I 型肺泡上皮细胞中实现了显著的基因沉默，分别使平足蛋白 (podoplanin) mRNA 表达量降低 29% 和 24%。 GALA/Chol-MEND (2 mg AuNPs/kg；静脉注射；单剂量) 可穿过小鼠肺气血屏障，将金纳米颗粒递送至肺内皮细胞、肺泡上皮细胞和肺泡巨噬细胞。
 

Francois, N. et al. Biophys. J. 76, 2121 (1999);

Li, W. et al. Adv. Drug Del. Rev.56, 967 (2004).

多肽H2N-Trp-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-His-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Glu-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH的合成步骤：

1、合成CTC树脂：称取2.75g CTC Resin（如初始取代度约为1.03mmol/g）和3.4mmol Fmoc-Ala-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入8.5mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到  Fmoc-Ala-CTC Resin。结构图如下：

2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Ala-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取8.5mmol Fmoc-Ala-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入17.0mmol DIPEA，8.07mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ala-Ala-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

Fmoc-Trp(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Trp(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-His(Trt)-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Glu(OtBu)-Ala-Leu-Ala-Ala-CTC Resin，结构如下：

5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Trp-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-His-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Ala-Glu-Ala-Leu-Glu-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

7、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。

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