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专注多肽 服务科研
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一种有效的香草酸受体 1 (VR1，TRPV1) 的拮抗剂，IC50 值为 0.1 μM。L-R4W2 可用作为一种有效的镇痛药。
编号：200669
CAS号：206350-79-0
单字母：H2N-RRRRWW-CONH2
| 编号: | 200669 |
| 中文名称: | 六肽L-R4W2 |
| CAS号: | 206350-79-0 |
| 单字母: | H2N-RRRRWW-CONH2 |
| 三字母: | H2N N端氨基：N-terminal amino group。在肽或多肽链中含有游离a-氨基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列时，通常将N端放在肽链的左边。 -ArgL-精氨酸：arginine。系统命名为(2S)-氨基-5-胍基戊酸。在生理条件下带正电荷，为编码氨基酸。是幼小哺乳动物的必需氨基酸。符号：R，Arg。 -ArgL-精氨酸：arginine。系统命名为(2S)-氨基-5-胍基戊酸。在生理条件下带正电荷，为编码氨基酸。是幼小哺乳动物的必需氨基酸。符号：R，Arg。 -ArgL-精氨酸：arginine。系统命名为(2S)-氨基-5-胍基戊酸。在生理条件下带正电荷，为编码氨基酸。是幼小哺乳动物的必需氨基酸。符号：R，Arg。 -ArgL-精氨酸：arginine。系统命名为(2S)-氨基-5-胍基戊酸。在生理条件下带正电荷，为编码氨基酸。是幼小哺乳动物的必需氨基酸。符号：R，Arg。 -TrpL-色氨酸：tryptophan[e]。系统命名为(2S)-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸。是编码氨基酸，哺乳动物的必需氨基酸。符号：W，Trp。某些抗菌素中含有 D-色氨酸。 -TrpL-色氨酸：tryptophan[e]。系统命名为(2S)-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸。是编码氨基酸，哺乳动物的必需氨基酸。符号：W，Trp。某些抗菌素中含有 D-色氨酸。 -CONH2C端酰胺化 |
| 氨基酸个数: | 6 |
| 分子式: | C46H71N21O6 |
| 平均分子量: | 1014.19 |
| 精确分子量: | 1013.59 |
| 等电点(PI): | - |
| pH=7.0时的净电荷数: | 4.97 |
| 平均亲水性: | 0.86666666666667 |
| 疏水性值: | -3.3 |
| 消光系数: | 11000 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 未分类肽 |
L-R4W2 是一种有效的香草酸受体 1 (VR1，TRPV1) 的拮抗剂，IC50 值为 0.1 μM。L-R4W2 可用作为一种有效的镇痛药。
L-R4W2 is a potent antagonist of vanilloid receptor 1 (VR1, TRPV1), with an IC50 of 0.1 μM. L-R4W2 may act as a potent analgesic[1][2].
Planells-Cases R, et, al. Arginine-rich peptides are blockers of VR-1 channels with analgesic activity. FEBS Lett. 2000 Sep 15; 481(2): 131-6. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10996311/
Himmel HM, et, al. The arginine-rich hexapeptide R4W2 is a stereoselective antagonist at the vanilloid receptor 1: a Ca2+ imaging study in adult rat dorsal root ganglion neurons. J Pharmacol Exp Ther. 2002 Jun; 301(3): 981-6. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12023528/
多肽H2N-Arg-Arg-Arg-Arg-Trp-Trp-NH2的合成步骤：
1、合成MBHA树脂：取若干克的MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：
2、脱Fmoc：取1.92g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取1.73mmol Fmoc-Trp(Boc)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入3.46mmol DIPEA，1.64mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Trp(Boc)-Linker-MBHA Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Arg-Arg-Arg-Arg-Trp-Trp-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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