一种血管活性肽，是肾素-血管紧张素系统 (RAS) 的成员，还是一种 G 蛋白偶联受体 MrgD 的内源性配体。
编号：200500
CAS号：1176306-10-7/2863659-13-4
单字母：H2N-ARVYIHP-OH
| 编号: | 200500 |
| 中文名称: | Alamandine |
| 英文名: | Alamandine |
| CAS号: | 1176306-10-7，free base 2863659-13-4，TFA盐 |
| 单字母: | H2N-ARVYIHP-OH |
| 三字母: | H2N N端氨基 -Ala丙氨酸 -Arg精氨酸 -Val缬氨酸 -Tyr酪氨酸 -Ile异亮氨酸 -His组氨酸 -Pro脯氨酸 -OHC端羧基 |
| 氨基酸个数: | 7 |
| 分子式: | C40H62N12O9 |
| 平均分子量: | 855 |
| 精确分子量: | 854.48 |
| 等电点(PI): | - |
| pH=7.0时的净电荷数: | 3.21 |
| 平均亲水性: | -0.78333333333333 |
| 疏水性值: | 0.04 |
| 消光系数: | 1490 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 血管活性肠肽 |
Alamandine 是一种血管活性肽，是肾素-血管紧张素系统 (RAS) 的成员，还是一种 G 蛋白偶联受体 MrgD 的内源性配体。Alamandine 可通过抗高血压作用来保护肾脏和心脏。
Alamandine, a member of the renin-angiotensin system (RAS), a vasoactive peptide, is an endogenous ligand of the G protein-coupled receptor MrgD. Alamandine targets to protect the kidney and heart through anti-hypertensive actions.
Alamandine是一种属于肾素-血管紧张素系统（RAS）的血管活性肽。它是G蛋白偶联受体MrgD的内源性配体。Alamandine通过抗高血压作用保护肾脏和心脏。
Alamandine is a vasoactive peptide belonging to the renin-angiotensin system (RAS). It is an endogenous ligand of the G protein-coupled receptor MrgD. Alamandine targets to protect the kidney and heart through anti-hypertensive actions.
Daniel C Villela, et al. Alamandine: a new member of the angiotensin family. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2014 Mar;23(2):130-4. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24389733
Johanna Schleifenbaum. Alamandine and Its Receptor MrgD Pair Up to Join the Protective Arm of the Renin-Angiotensin System. Front Med (Lausanne). 2019 Jun 11;6:107. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31245374
Chi Liu, et al. Alamandine attenuates hypertension and cardiac hypertrophy in hypertensive rats. Amino Acids. 2018 Aug;50(8):1071-1081. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29752563
多肽H2N-Ala-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取2.88g CTC Resin（如初始取代度约为1.06mmol/g）和3.66mmol Fmoc-Pro-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入9.16mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Pro-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Pro-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取9.16mmol Fmoc-His(Trt)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入18.32mmol DIPEA，8.7mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-His(Trt)-Pro-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-His(Trt)-Pro-CTC Resin
Fmoc-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
H2N-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
H2N-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
Fmoc-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
H2N-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
H2N-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
Fmoc-Ala-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Ala-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-CTC Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Ala-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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