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Melan A对应于未突变的黑素瘤相关抗原MART-1/Melan A的残基27-35。序列AAGIGILTV是大多数黑素瘤特异性,HLA-A*0201限制性,细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的免疫显性表位。
编号:116011
CAS号:156251-11-5
单字母:H2N-AAGIGILTV-OH
| 参考文献(References): | A.van Elsas et al., Eur. J. Immunol., 26, 1683 (1996) M.J.Mäurer et al., Eur. J. Immunol., 26, 2613 (1996) J.N.Cormier et al., Cancer J. Sci. Am., 3, 37 (1997) F.O.Nestle et al., Nat. Med., 4, 328 (1998) M.P.Velders et al., Crit. Rev. Immunol., 18, 7 (1998) |
Melan A对应于未突变的黑素瘤相关抗原MART-1/Melan A的残基27-35。序列AAGIGILTV是大多数黑素瘤特异性,HLA-A*0201限制性,细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的免疫显性表位。
Melan A corresponds to residues 27-35 of the nonmutated melanoma-associated antigen MART-1/Melan A. The sequence AAGIGILTV is the immunodominant epitope recognized by most melanoma-specific, HLA-A*0201-restricted, cytotoxic T lymphocytes (CTL).
细胞毒性T细胞(CTL)识别的肿瘤抗原是开发抗原特异性癌症疗法的热门研究领域。然而,障碍是免疫原性弱和体内降解率高。在寻找黑色素瘤疫苗时,人类肿瘤抗原Melan-a/MART-1(27-35)已被用作模型,以设计具有改进特性的肽,用于抗肿瘤疫苗。该表位可以诱导黑素瘤特异性CD8+T细胞应答的产生。它已被包括在黑色素瘤抗原肽疫苗中,临床试验数据表明,人类系统中的MART-1(27-35)与其他表位一起确实会影响细胞和体液反应,但这种肽需要做更多的工作才能优化其对黑色素瘤的临床疗效。一种可能但研究较少的替代途径是使用MART-1(27-35)分离CD8(+)T细胞克隆,由于与T细胞受体的接触,对表位的识别程度更高。这表明可以通过增强抗原靶向来优化T细胞库的T细胞受体肽识别来靶向黑素瘤。
Tumour antigens recognised by cytotoxic T cells (CTLs) are a keen area of research to develop antigen-specific cancer therapies. However, hurdles are weak immunogenicity and high rates of degradation in vivo. In the search for a melanoma vaccine, the human tumour antigen Melan-A/MART-1 (27-35) has been used as a model to design peptides with improved characteristics for use in anti-tumour vaccines. The epitope can induce the production of melanoma-specific CD8+ T-cell responses. It has been included in melanoma antigen peptide vaccines, clinical trial data suggest that MART-1 (27-35) in human systems alongside other epitopes does affect the cellular and humoral responses, but much more work is required with this peptide to optimise it for clinical efficacy against melanoma.An alternate route that is possible but less studied is using MART-1 (27-35) to isolate CD8(+) T-cell clones with greater recognition for the epitope due to the contact with the T-cell receptor. This suggests melanomas could be targeted by optimising the T-cell receptor-peptide recognition of the T-cell repertoire by enhancing antigen targeting.
MART-1 (27–35)(人源)是一种广泛用于研究黑素细胞相关蛋白识别的抗原多肽。其序列可用于分析表位呈递和主要组织相容性复合体结合基序。研究人员利用它探究对 T 细胞识别模型有贡献的构象偏好。该多肽有助于对黑色素瘤相关表位进行结构定位。
MART-1 (27–35) (human) is an antigenic peptide widely used in studies of melanocyte-associated protein recognition. Its sequence supports analyses of epitope presentation and MHC-binding motifs. Researchers apply it to probe conformational preferences contributing to T-cell recognition models. The peptide aids structural mapping of melanoma-associated epitopes.
MART-1 (27–35)(人源)是一种广泛用于研究黑素细胞相关蛋白识别的抗原多肽。其序列可用于分析表位呈递和主要组织相容性复合体结合基序。研究人员利用它探究对 T 细胞识别模型有贡献的构象偏好。该多肽有助于对黑色素瘤相关表位进行结构定位。
MART-1 (27–35) (human) is an antigenic peptide widely used in studies of melanocyte-associated protein recognition. Its sequence supports analyses of epitope presentation and MHC-binding motifs. Researchers apply it to probe conformational preferences contributing to T-cell recognition models. The peptide aids structural mapping of melanoma-associated epitopes.
化学预防肽是有助于预防疾病(例如癌症或糖尿病)的发作或发展的肽。这些肽可以源自天然来源,例如大豆或牛奶,也可以来自肽模拟物的设计,也可以源自使用合成肽进行的肽筛选。据认为,这些肽中的某些可以充当细胞周期的调节剂,其调节使细胞通过复制周期前进所需的蛋白质的产生和功能。另外,现在有越来越多的证据表明特定的饮食模式,食物和饮料以及其他饮食物质可以而且确实可以预防癌症。越来越多的流行病学研究表明,食物,营养和身体活动在预防和改变癌症过程中很重要。包括植物蛋白酶抑制剂,乳铁蛋白,乳铁蛋白,凝集素和lunasin在内的不同类型的食物蛋白和多肽似乎起着化学预防剂的作用。如今,蛋白质和多肽被认为是一组营养保健品,在预防癌症的不同阶段(包括起始,促进和进展)方面显示出潜力。此外,已经发现在植物中发现的一些蛋白酶抑制剂,例如豆类和大豆,是有效的癌发生抑制剂。致癌作用是引发和促进癌症的过程。 Bowman-Birk抑制剂和Kunitz胰蛋白酶抑制剂就在其中。目前,这些化合物在致癌作用中的生物学功能主要归因于抑制癌细胞的侵袭和转移,但是,其作用机理仍不完全清楚,需要进一步研究以充分阐明它们。
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1002/eji.1830260803 | Peptide-pulsed dendritic cells induce tumoricidal cytotoxic T lymphocytes from healthy donors against stably HLA-A*0201-binding peptides from the Melan-A/MART-1 self antigen | 下载 |
| 10.1615/critrevimmunol.v18.i1-2.30 | Identification of peptides for immunotherapy of cancer. It is worth the effort | 下载 |
| 10.1038/nm0398-328 | Vaccination of melanoma patients with peptide- or tumor lysate-pulsed dendritic cells | 下载 |
多肽H2N-Ala-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr-Val-COOH的合成步骤:
1、合成CTC树脂:称取0.13g CTC Resin(如初始取代度约为0.48mmol/g)和0.07mmol Fmoc-Val-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入0.19mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到 Fmoc-Val-CTC Resin。结构图如下:

2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Val-CTC Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:

3、缩合:取0.19mmol Fmoc-Thr(tBu)-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入0.37mmol DIPEA,0.18mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Thr(tBu)-Val-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:

4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到
H2N-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
H2N-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
Fmoc-Ala-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin
以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Ala-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr(tBu)-Val-CTC Resin,结构如下:

5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品H2N-Ala-Ala-Gly-Ile-Gly-Ile-Leu-Thr-Val-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)
6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽
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