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定义
胸腺生成素（TP）最初是从牛胸腺中分离出来的一种5kDa，49个氨基酸的蛋白质，用于研究胸腺提取物对神经肌肉传递的影响，随后被观察到会影响T细胞的分化和功能¹。

相关肽
五肽胸腺五肽（TP5），代表最初描述的TP的活性序列。TP被确定为胸腺生成素（TMPOs），核蛋白²家族的一个片段。三个选择性剪​​接的mRNA编码三个不同的人类T细胞TP。这些mRNA编码的蛋白质已被命名为TPa（75 kDa），TPß（51 kDa）和TP？（39 kDa），其中包含相同的N端区域，包括与最初分离的49个氨基酸蛋白几乎相同的序列，但C端区域不同¹。

发现
1994年，Harris等人鉴定了编码三个不同的人类T细胞TP的三个选择性剪​​接的mRNA，并将其命名为这些mRNA编码的蛋白，TPa，TPß和TP？¹。

结构特征
TP a，ß和？中不同的结构域和功能基序。提示蛋白质具有独特的功能，并且可能针对不同的亚细胞区室。人类TP a，ß和？预测的前49个氨基酸。cDNA与最初纯化的牛5-kDa TP所确定的序列非常相似，仅5个氨基酸不同。从人TPa，ß和？预测的序列 cDNA与Zevin-Sonkin等报道的从牛cDNA预测的序列相似，从氨基酸1到氨基酸81，仅在13位（人中为Asp，牛中为Glu）和53-56位（Pro-人的Ala-Gly-Thr，牛的Ala-Thr-Ser-Ala）；但除了氨基酸81外，在核苷酸或氨基酸序列^1中没有其他同源性。

作用模式
体外测定表明，TP5通过提高cGMP水平和触发细胞信号传导^2来影响T细胞和单核细胞的功能²。

功能
胸腺肽素是TP的活性片段，可通过降低血浆TP（pTP）水平来降低对实验压力的内分泌和行为反应。（pTP升高与对抗抑郁药无反应性的显着相关性可能预示着pT ³升高患者抑郁症的独特发病机制。TP片段TP-3，TP-4和TP-5可以增强T淋巴细胞的成熟和活性。这些TP片段在骨髓的早期和循环的后期都增强了T细胞的分化。在一项研究中分析了TP片段TP-3，TP-4和TP-5恢复抗体产生和吞噬的能力。长春新碱，氨甲蝶呤和环磷酰胺处理可降低腹膜巨噬细胞的吞噬能力。在这方面，TP-3保护巨噬细胞抵抗长春新碱和环磷酰胺的作用。TP-4在长春新碱和甲氨蝶呤造成的损害中很活跃，而TP-5干扰了甲氨蝶呤的吞噬抑制作用。每个TP片段在免疫系统中似乎都有特定的靶标方向。⁴。

参考 

1. Crafford A. Harris, Paula J. Andryuk, Scott Cline, H. Karen Chan, Anan Natarajan, John J. Siekierka and Gideon Goldstein (1994). Three distinct human thymopoietins are derived from alternatively spliced mRNAs. PNAS.,91:6283-6287..
2. Gonser S, Weber E, Folkers G  (1999).  Peptides and polypeptides as modulators of the immune response: thymopentin — an example with unknown mode of action. Pharmaceutica Acta Helvetiae, 73(6):265-273.
3. Goldstein G, Fava M, Culler M, Fisher A, Rickels K, Lydiard RB, Rosenbaum J (2000). Elevated plasma thymopoietin associated with therapeutic nonresponsiveness in major depression. Biological Psychiatry, 48(1):65-69.
4. Dénes L, Szende B, Hajós G, Szporny L, Lapis K (1990). Selective restoration of immunosuppressive effect of cytotoxic agents by thymopoietin fragments. Cancer Immunol Immunother., 32:51-54.

多肽H2N-Tyr-Gln-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-COOH的合成步骤：

1、合成CTC树脂：称取2.74g CTC Resin（如初始取代度约为0.66mmol/g）和2.17mmol Fmoc-Asn(Trt)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入5.43mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到  Fmoc-Asn(Trt)-CTC Resin。结构图如下：

2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Asn(Trt)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取5.43mmol Fmoc-Ser(tBu)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入10.85mmol DIPEA，5.15mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

H2N-Gln(Trt)-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Gln(Trt)-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Tyr(tBu)-Gln(Trt)-Ala-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Gln(Trt)-Gly-Gly-Ser(tBu)-Asn(Trt)-CTC Resin，结构如下：

5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Tyr-Gln-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-COOH。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

7、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽

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