什么是定制多肽合成?
今天小编闲来没事,就以“定制多肽合成”为主题,聊一聊自己的理解。
目前市场上做定制多肽合成服务的公司,基本都是使用Fmoc固相多肽合成技术来合成对应序列的多肽序列,此技术是一种纯化学合成的方法。生物体内生成肽段的方向是从N端到C端,而化学合成的方向相反,是从C端往N端一个一个氨基酸的添加,最终形成完整的肽段。
至于化学合成方法怎么一个一个添加氨基酸,之前写过很多,这里就不多介绍了,可关注微信公众号“定制多肽合成”。
液相多肽合成方法:
常规的多肽合成,比如ACDEFGHIK,使用Fmoc固相多肽合成方法,是完全可以合成的。假如需要形成首尾酰胺键成环,主链的N端氨基和C端的羧基形成酰胺键,这时就需要先用Fmoc固相多肽合成带保护的肽段,然后全保护切割,在溶液中形成分子内酰胺键,这种在纯溶液中形成酰胺键的方法,我们行业内称之为 液相多肽合成方法。很多复杂结构的多肽都是需要固相和液相相结合来完成的,所以其价格会比较高。
多肽N端或C端修饰种类有哪些?
多肽合成价格是怎么计算的?
通常影响多肽价格的因素有 ,多肽的长度、多肽的纯度、多肽的数量、多肽的盐体系、多肽的修饰种类、多肽的难度评估。
多肽的长度:一般2-6个长度,价格都是一样的,长度越长,价格肯定是越高,一般是正比例关系,比如所有需求一样,20个氨基酸的肽段价格通常是10个氨基酸的肽段价格的两倍。
多肽的纯度:绝大多数的购买者都是选择HPLC>95%,这个纯度也是性价比最高的,HPLC>98%的话,属于高纯度了,容不得一点小杂质,价格是95%的1.2-1.4倍。
多肽的数量:这里的单位是重量单位mg、g、kg,基本都是用mg或者g,比如我需要5mg,10mg或者100mg。这里有个经验之谈,就是很多时候,200mg的价格是100mg的1.4倍、500mg的价格是100mg的1.9倍,数量增加到了5倍,价格才2倍不到。并不是成正比例关系,所以建议适当多买点,防止不够用而重新购买,不仅耽误时间还要花更多的钱。
多肽的盐体系:多肽因为都是通过高效液相色谱方法纯化的,因为流动相的原因,多肽都是携带酸的,比如三氟乙酸体系,醋酸体系,盐酸体系,磷酸体系等,而一般多肽公司的报价都是默认三氟乙酸体系,很多销售都不会说出来的,除非询价时备注了多肽的酸体系。
醋酸体系、盐酸体系的价格一般是默认的三氟乙酸体系价格的1.3-1.4倍,因为多肽公司要多纯化一遍,置换掉三氟乙酸,成本高了,收率低了,于是乎价格就高了。
多肽的修饰种类:多肽有修饰的价格肯定比没有修饰的价格高的,现在基本上N端乙酰化,C端酰胺化是免费的,其它修饰都是要额外收费的,不过不用担心,很多常规的修饰,其价格不贵的。比如5Fam修饰,需要5mg的话,修饰价格才400多。
多肽的难度评估:除非多肽有这几点特征,特别疏水、特别长、特别易氧化、特别不稳定、序列一直循环,不然报价都不考虑这一点的。
多肽合成一般要多长时间?
常规的序列,不需要成环的话,假如一个人只合成这一条,20个氨基酸以内,6工作日就可以完成合成,纯化,冻干。
多肽公司一般都是很多多肽订单同时安排的,所以大部分订单基本上要2-3周。