生物素化的肽在免疫检测研究中非常有用,例如将肽连接到抗生物素蛋白包被的微量滴定板。
在Fmoc固相多肽合成过程中,生物素可以连接至肽段的N端或赖氨酸(Lys)的侧链。
在生物素和肽之间掺入Linker可用于减少随后的生物素与抗生物素蛋白结合的空间位阻。常用Linker分为 烃链和聚环氧乙烷PEG链两种,后者具有改善试剂和生物素化肽的溶解度的附加优点。
下面主要是通过结构图来展示下 不同linker,不同位置之间的结果区别。结构图由多肽结构图计算器自动生成。
以下所有结构展示均以RGD三肽标记生物素为例。
1、生物素最常见的修饰位点,就是多肽的N端。
1.1 不使用Linker直接标记生物素,标记后的序列为 Biotin-RGD,结构图如下:
1.2 使用烃链作为Linker,最常见的就是 6-氨基己酸(简写为 Ahx 或Acp),标记后的序列为 Biotin-Ahx-RGD,结构图如下:
1.3 使用聚环氧乙烷PEG作为Linker,最常见的就是PEG2(也可简写为AEEA),标记后的序列为 Biotin-PEG2-RGD,结构图如下:
2、生物素标记在C端,通常在C端加一个赖氨酸,然后将生物素标记在赖氨酸的侧链氨基上。
2.1 生物素直接标记在Lys的侧链,标记后的序列为 RGD-Lys(Biotin),结构图如下:
2.2 生物素直接标记在Lys的侧链并在生物素和Lys之间添加烃链,已增加空间距离,标记后的序列为 RGD-Lys(AhxBiotin),结构图如下:
以上所有序列,均可输入到多肽参数计算器中,以计算多肽的各类参数。
最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽等。