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专注多肽 服务科研
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专注多肽 服务科研
| 编号: | 201528 |
| 中文名称: | 三肽FITC-Acp-Ala-Lys |
| 单字母: | 5FITC-Ahx-AK-OH |
| 三字母: | 5FITC N端FITC标记 -Ahx6-氨基己酸（Ahx，C6）是一种疏水性间隔基，通常被掺入到序列中，用于将肽与标签和染料分隔开。 -Ala丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -LysL-赖氨酸：lysine。系统命名为(2S)-6-二氨基已酸。是编码氨基酸中的碱性氨基酸，哺乳动物的必需氨基酸。在蛋白质中的赖氨酸可以被修饰为多种形式的衍生物。符号：K，Lys。 -OHC端羧基：C-terminal carboxyl group。在肽或多肽链中含有游离羧基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列时，通常将C端放在肽链的右边。 |
| 氨基酸个数: | 3 |
| 分子式: | C36H41N5O9S1 |
| 平均分子量: | 719.8 |
| 精确分子量: | 719.26 |
| 等电点(PI): | - |
| pH=7.0时的净电荷数: | 1 |
| 平均亲水性: | 1.25 |
| 疏水性值: | -1.05 |
| 消光系数: | - |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 氨基酸衍生物肽 三肽 FITC标记肽 |
FITC标记说明:
Fluorescein isothiocyanate (FITC) is a fluorophor with an excitation at 490 nm ▉ and emission of 520 nm ▉.
FITC标记肽的相关文献
Small Molecule Allosteric Inhibitors of BAX.
Garner, Thomas P., Dulguun Amgalan, Denis E. Reyna, Sheng Li, Richard N. Kitsis, and Evripidis Gavathiotis. Nature Chemical Biology 15, no. 4 (2019): 322.
Non-invasive early detection of acute transplant rejection via nanosensors of granzyme B activity.
Mac, Quoc D., Dave V. Mathews, Justin A. Kahla, Claire M. Stoffers, Olivia M. Delmas, Brandon Alexander Holt, Andrew B. Adams, and Gabriel A. Kwong. Nature Biomedical Engineering 3, no. 4 (2019): 281.
Eltrombopag directly inhibits BAX and prevents cell death.
Spitz, A. Z.; Zacharioudakis, E.; Reyna, D. E.; Garner, T. P.; Gavathiotis, E., Nature Communications 2021, 12 (1), 1-15.
Urinary detection of early responses to checkpoint blockade and of resistance to it via protease-cleaved antibody-conjugated sensors.
Mac, Quoc D., Anirudh Sivakumar, Hathaichanok Phuengkham, Congmin Xu, James R. Bowen, Fang-Yi Su, Samuel Z. Stentz et al. Nature Biomedical Engineering (2022): 1-15.
Co-targeting of BAX and BCL-XL proteins broadly overcomes resistance to apoptosis in cancer.
Lopez, Andrea, Denis E. Reyna, Nadege Gitego, Fel
多肽5FITC-Ahx-Ala-Lys-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取0.64g CTC Resin（如初始取代度约为1.16mmol/g）和0.89mmol Fmoc-Lys(Boc)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入2.23mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Lys(Boc)-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Lys(Boc)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取2.23mmol Fmoc-Ala-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入4.45mmol DIPEA，2.12mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ala-Lys(Boc)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Ala-Lys(Boc)-CTC Resin
Fmoc-Ahx-Ala-Lys(Boc)-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Ahx-Ala-Lys(Boc)-CTC Resin，结构如下：
5、异硫氰酸荧光素酯 FITC反应连接：在上述树脂中，加入适当DMF后，再加入2.23mmol异硫氰酸荧光素酯 FITC到树脂中，再加入4.45mmol DIPEA，鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。 得到5FITC-Ahx-Ala-Lys(Boc)-CTCResin。 结构如下：
6、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品5FITC-Ahx-Ala-Lys-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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