编号:139887
CAS号:1815618-03-1
单字母:Biotinyl-QGPWLEEEEEAYGWMDF-CONH2
用于胃肠道研究的多肽
胃肠疾病简介
胃肠道是人体最大的免疫器官。胃肠道是指从胃幽门到肛门的消化道,包括胃、小肠、大肠等部分。肠道是消化道最长的部分,也是其功能最重要的部分。胃肠道不是由肌肉和黏膜组成的简单管道,而是在复杂神经系统的神经支配下发挥作用的一个整体。胃肠道是消化系统的主要器官,它为身体吸收足够的水分和必需的营养物质。胃肠道疾病的种类和范围相当广泛。胃肠道疾病主要指一般炎症性胃肠道疾病(急慢性胃炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、急慢性阑尾炎等)、消化性溃疡、胃癌、食道癌、结直肠癌、肠易激综合征、细菌性痢疾、肠道梗阻、短肠综合征、大肠息肉、肛裂、肛瘘等。
胃肠疾病现状
据世界卫生组织称,胃肠道疾病对人类健康构成了巨大威胁。每年,全世界有超过 1000 万人死于胃肠道疾病。胃肠道疾病的特点是病程较长、治疗难度较大、反复发作。如今,胃肠道疾病的发病率很高。年龄越大,发病率越高,尤其是50岁以上的中老年患者。男性的发病率高于女性。胃肠道疾病如果不及时治疗,时间长了会反复发作,很容易转化为癌症。
胃肠道疾病的症状
症状可能因胃肠道疾病的位置和疾病的性质而异。胃肠道疾病的症状主要有食欲不振、恶心呕吐、腹痛、腹胀、腹泻、便秘等。胃肠道疾病也可能因出血、穿孔、梗阻和癌症而复杂化。
胃肠道疾病的原因
胃肠道疾病的病因是胃黏膜保护因子和攻击因子失衡,导致胃肠黏膜保护因子弱于攻击因子。生活中胃肠道疾病的发生通常与患者的心理因素、饮食、肠道感染、内脏胃肠动力变化、遗传因素和环境因素等有关。
胃肠道疾病的治疗
胃肠道黏膜中有几十个内分泌细胞,它们分泌的激素统称为胃肠激素。胃肠激素都是肽。构成肽链的氨基酸残基数量从几个到几十个不等。这些肽广泛分布于胃肠道黏膜和内在神经系统,对胃肠道平滑肌运动、黏膜腺体分泌、血液供应、局部炎症细胞、免疫活性细胞和细胞因子等具有重要的调节作用。
胃肠道研究的多肽汇总
1、胃动素
胃动素是小肠上部内分泌细胞分泌的一种22个氨基酸的肽,其主要生物学作用是参与消化间期和餐后胃肠运动的调节。近年来研究发现胃动素缺乏与功能性消化不良、肠易激综合征等胃肠道疾病的发生有关。
名称 CAS号 序列 编号
胃动素,犬 85490-53-5 FVPIFTHSELQKIREKERNKGQ 165195
胃动素(人、猪) 52906-92-0 FVPIFTYGELQRMQEKERNKGQ 191529
2、促胃动素
促胃动素是小肠上部内分泌细胞分泌的一种由22个氨基酸组成的肽,其主要生物学作用是参与消化间期和餐后胃肠运动的调节。近年来研究发现胃动素缺乏与功能性消化不良、肠易激综合征等胃肠道疾病的发生有关。
名称 CAS号 序列 编号
胃动素,犬 85490-53-5 FVPIFTHSELQKIREKERNKGQ 165195
促胃动素(人、猪) 52906-92-0 FVPIFTYGELQRMQEKERNKGQ 191529
3、胃泌素
胃泌素的主要功能是刺激胃酸分泌,促进胃肠蠕动,参与铁稳态的维持。同时,胃泌素还能刺激胰腺、胆汁和肠液的分泌,进一步分解小肠内的食物,有利于小肠对营养物质的吸收。
名称 CAS号 序列 编号
胃泌素 I(人类) 10047-33-3 Pyr-GPWLEEEEEEAYGWMDF-NH2 125058
[Leu15]-胃泌素 I(人) 39024-57-2 Pyr-GPWLEEEEEEAYGWLDF-NH2 194067
胃泌素 I (1-14),人类 100940-57-6 Glp-GPWLEEEEEEAYGW 134023
CCK-4醋酸酯 35144-91-3 Trp-Met-Asp-Phe-NH2 111475
五胃泌素 5534-95-2 Boc-bAla-Trp-Met-Asp-Phe-NH2 132402
迷你胃泌素 I,人类 54405-27-5 LEEEEEAYGWMDF-NH2 136910
大胃泌素 1,人类 60675-77-6 Pyr-LGPQGPPXLVADPSKKQGPWLEEEEEEAYGWMDF-NH2 145590
胃泌素 I 大鼠 81123-06-0 Pyr-RPPMEEEEEAYGWMDF-NH2 180253
4、蟾蜍素
铃蟾肽是一种含有 14 个氨基酸残基的生物活性肽。铃蟾肽能刺激其他几种胃肠激素的释放,调节胃肠蠕动,刺激消化道正常粘膜组织的生长,提高致死性小肠结肠炎动物的存活率。
名称 CAS号 序列 编号
蟾蜍素 31362-50-2 Glp-QRLGNQWAVGHLM-NH2 165361
铃蟾肽九肽 55750-00-0 NQWAVGHLM 400427
5、速激肽
速激肽家族都是单链多肽,在羧基末端具有共同的氨基酸序列。速激肽能引起胃肠平滑肌强烈收缩,促进胃排空和肠内容物转运。目前已发现的速激肽包括P物质、神经肽A、神经肽B、神经肽K和神经肽γ。
名称 CAS号 序列 编号
皂甙 69-25-0 Pyr-PSKDAFIGLM-NH2 175600
肛褶蛙肽 63968-82-1 DVPKSDQFVGLM-NH2 128268
神经激肽A 86933-74-6 HKTDSFVGLM-NH2 147461
神经激肽 A (4-10) 97559-35-8 DSFVGLM-NH2 174006
神经激肽B 86933-75-7 DMHDFFVGLM-NH2 143980
物质 P (1-7) 68060-49-1 RPKPQQF 180316
6、生长抑素
生长抑素是一种含有14个氨基酸残基的环状多肽。生长抑素在调节多种内分泌和内分泌过程中起重要作用。生长抑素的主要作用是抑制胃酸分泌,减少胰腺的内分泌和外分泌。
奥曲肽是一种人工合成的8肽生长抑素类似物,其生理作用与生长抑素相似,半衰期为1-2小时。奥曲肽可抑制胃液和胰液的分泌,广泛用于消化道出血、急性胰腺炎、VIP瘤、胃泌素瘤等疾病的治疗。
名称 CAS号 序列 编号
奥曲肽 83150-76-9 DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-OL(二硫键:Cys2-Cys7) 198265
醋酸奥曲肽 79517-01-4 FC(1)FWKTC(1)T 198265
7、血管活性肠肽 (VIP) 及相关肽
血管活性肠肽(VIP)由28个氨基酸组成,主要由肠神经元释放。VIP在活体中具有双重作用,既作为胃肠激素又作为神经肽。作为一种神经肽,VIP的主要作用是扩张心脑血管,调节脑血流,降低肺动脉压,降低血压。VIP作为一种胃肠激素,在消化系统中的主要作用是抑制胃酸和胃蛋白酶的分泌,松弛肠道平滑肌,使食管下端括约肌、肠道平滑肌、肛门内括约肌松弛。因此,VIP水平的变化与胃肠道疾病密切相关,是胃肠道疾病研究的重要指标。
名称 CAS号 序列 编号
Prepro VIP (111-122),人类 123025-94-5 VSSNISEDPPVPV 142625
Prepro VIP (81-122),人类 111366-38-2 HADGVFTSDFSKLLGQLSAKKYLESLMGKRVSSNISEDPVPV 150156
VIP (6-28)(人、大鼠、猪、牛) 69698-54-0 FTDNYTRLRKQMAVKKYLNSILN-NH2 116303
[Dp-Cl-Phe6,Leu17]-VIP 102805-45-8 HSDAVXXDNYXRLRKQLAVKKYLNSXLN /
8、神经降压素
神经降压素是一种含有13个氨基酸残基的单链肽,由中枢神经系统和胃肠道合成和分泌,在脑和胃肠道中起着重要的协调作用。神经降压素可保护气道免受寒冷刺激引起的胃粘膜损伤,并可抑制胃酸分泌。神经降压素和其他神经肽参与肠道运动的调节。
名称 CAS号 序列 编号
神经降压素 (8-13) 60482-95-3 RRPYIL 145083
神经降压素 39379-15-2 Pyr-LYENKPRRPYIL 154570
[Gln4]-神经降压素 61445-54-3 XLYQNKPRRPYIL 198643
激动素 103131-69-7 IARRHPYFL 198975
爪蟾蛋白 51827-01-1 Pyr-GKRPWIL 164416
9、胆囊收缩素
胆囊收缩素(CCK)由小肠粘膜内壁I型分泌细胞分泌,其生理作用不仅是刺激胰液和胆汁的分泌,还可以调节胃肠动力。CCK的主要功能是减少食物摄入,抑制胃排空和胃酸分泌,刺激胆囊收缩和分泌胰腺消化酶。
名称 CAS号 序列 编号
CCK 八肽(非硫酸化) 25679-24-7 DYMGWMDF-NH2 195755
Gastrin (14-17) (human) 35144-91-3 Trp-Met-Asp-Phe-NH2 111475
10、胰泌素
分泌素是由27个氨基酸残基组成的肽类激素。分泌素几乎由所有肠内分泌细胞分泌,但主要由位于十二指肠粘膜的 S 细胞分泌。胰泌素的主要功能是抑制胃动力和胃酸分泌,并参与体内液体的平衡/渗透压调节。
名称 CAS号 序列 编号
促胰液素醋酸盐 10813-74-8 HSDGTFTSELSRLRDSARLQRLLQGLV-NH2 143392
分泌素(大鼠) 121028-49-7 HSDGTFTSELSRLQDSARLQRLLQGLV-NH2 150160
胰泌素 (28-54),人 108153-74-8 HSDGTFTSELSRLREGARLQRLLQGLV-NH2 198686
分泌素,犬 110786-77-1 HSDGTFTSELSRLRESARLQRLLQGLV-NH2 200685
分泌素 (5-27)(猪) 19665-15-7 TFTSELSRLRDSARLQRLLQGLV-NH2 145730
11、胰多肽
胰多肽是由36个氨基酸组成的肽类激素,参与体内新陈代谢。胰多肽对胃肠道有广泛的作用,主要是抑制胃酸分泌和保护胃粘膜。
名称 CAS号 序列 编号
胰多肽,牛 179986-89-1 APLEPEYPGDNATPEQMAQYAAELRRYINMLTRPRY-NH2 200284
胰多肽,人 75976-10-2 APLEPVYPGDNATPEQMAQYAADLRRYINMLTRPRY-NH2 194468
胰多肽,大鼠 90419-12-8 APLEPMYPGDYATHEQRAQYETQLRRYINTLTRPRY-NH2 157282
12、肽YY
肽YY(PYY)是一种胃肠肽激素,主要由结肠和回肠粘膜的内分泌细胞分泌。YY肽的主要作用是减少食物摄入,减少胰腺外分泌,抑制胃肠蠕动和胃酸分泌。
名称 CAS号 序列 编号
肽YY (3-36) 126339-09-1 IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY-NH2 200293
肽YY(3-36)人 123583-37-9 IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY 198454
肽 YY,人类 118997-30-1 YPIKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY 132375
13、神经肽Y
神经肽Y是由36个氨基酸组成的肽类激素,结构中富含酪氨酸,属于胰多肽家族。神经肽Y释放后,主要通过神经肽Y受体发挥作用,影响摄食行为、激素分泌和胃肠功能。
名称 CAS号 序列 编号
神经肽 Y(人,大鼠) 90880-35-6 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH2 176022
神经肽 Y (13-36),酰胺,人 122341-40-6 PAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH2 199416
神经肽Y 22-36 119019-65-7 SALRHYINLITRQRY-NH2 139969
神经肽 Y (29-64) 303052-45-1 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY 122423
神经肽 Y(游离酸)(人、大鼠) 99575-89-0 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY 122423
14、阿片肽
阿片肽在 N 端共享一个共同的 5 个氨基酸序列。阿片肽可分为三类:脑啡肽、强啡肽和内啡肽。阿片肽可以调节胃肠蠕动。
名称 CAS号 序列 编号
[DAla2]-Leu-Enkephalin-Arg 81733-79-1 H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH 135373
强啡肽 A (1-13) 72957-38-1 YGGFLRRIRPKLK 116368
强啡肽 B 1-13 83335-41-5 YGGFLRRQFKVVT 117754
甲硫氨酸脑啡肽 58569-55-4 H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH 145193
N-乙酰-α-内啡肽 88264-63-5 Ac-YGGFMTSEKSQTPLVT 171588
β-内啡肽,大鼠 77367-63-6 YGGFMTSEKSQTPLVTLFKNAIIKNVHKKGQ 195443
β-酪啡肽,人类 102029-74-3 YPFVEPI 132731
β-酪啡肽 (1-3),酰胺 80705-23-3 Tyr-Pro-Phe-NH2 167339
β-酪啡肽 (1-5),酰胺,牛 83936-23-6 Tyr-d-Ala-Phe-Pro-Met 200643
β-酪啡肽 (1-6),牛 77434-43-6 Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro 163513
β-酪啡肽 (1-7),牛 72122-62-4 YPFPGPI 145444
α-新内啡肽 1-8 83339-89-3 YGGFLRKY 200655
β-新内啡肽 77739-21-0 YGGFLRKYP 117163
15、抑胃多肽
胃抑制多肽(GIP)是由43个氨基酸组成的线性多肽,由小肠黏膜K细胞产生。GIP的生理功能是抑制胃酸分泌,抑制胃蛋白酶分泌,刺激胰岛素释放,抑制胃蠕动和排空,刺激小肠液分泌,刺激胰高血糖素分泌。
名称 CAS号 序列 编号
GIP(人类) 100040-31-1 YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKGKKNDWKHNITQ 114120
GIP (1-39) 725474-97-5 YAEGTFISDYSIAMDKIRQQDFVNWLLAQKGKKSDWKHN 208477
专肽生物合成用于蛋白质-蛋白质相互作用研究的生物素化肽。尽管生物素可以在 N 端或 C 端引入(通过赖氨酸残基),但我们建议使用 N 端修饰,因为它成本低、成功率高、周转时间短且易于操作。因为多肽合成是从 C 端到 N 端合成的,因此,N 端修饰是 SPPS步骤的最后一步,不需要额外的特定缩合步骤。相比之下,C 端修饰需要额外的步骤,并且通常更复杂。当然,原则上生物素可以定位在任何地方。
生物素可以通过多种不同的接头或间隔物与肽分离。尽管如此,还是建议包含一个灵活的间隔物,例如 Ahx(一个 6 碳接头),以使生物素标签更加稳定或灵活。
专肽生物在 N 端或 C 端提供生物素化:生物素-N 端、赖氨酸-生物素-肽中间和赖氨酸-生物素-C 端。
专肽生物还可以使用 Ahx 接头或长碳 (LC) 接头提供生物素化:生物素-Ahx-N 末端、Lys-Ahx-生物素-肽中间、Lys-Ahx-生物素-C-末端。
(生物素结构)
示例:
GRGDS在N端和C端标记生物素的结构展示。
1、GRGDS在N端标记生物素,不增加Ahx 接头
2、GRGDS在N端标记生物素,增加一个Ahx 接头
3、GRGDS在C端标记生物素,不增加Ahx 接头
4、GRGDS在C端标记生物素,增加一个Ahx 接头。
The pentadecapeptide BPC-157 (GEPPPGKPADDAGLV) shows a protective effect on stomach and duodenum when administered to stress ulcers, cysteamine-duodenal ulcers and ethanol lesions. Application of BPC 157 improved tendon healing.
多肽Biotin-Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2的合成步骤:
1、合成MBHA树脂:取若干克MBHA树脂(如初始取代度为0.5mmol/g)和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中,加入DMF,搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA,搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU,搅拌混合均匀。反应3-4小时后,用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次,甲醇洗涤2次,DCM洗涤2次,再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上,得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin},测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图:
2、脱Fmoc:取1.94g的上述树脂,用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:
3、缩合:取1.75mmol Fmoc-Phe-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入3.49mmol DIPEA,1.66mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Phe-Linker-MBHA Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:
4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到
H2N-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gly-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Gly-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Gly-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin
以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Gln(Trt)-Gly-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHA Resin,结构如下:
5、生物素反应连接:在上述树脂中,加入适当DMF后,再加入1.75mmol 生物素到树脂中,再加入3.49mmol DIPEA、1.66mmol HBTU,鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。 得到Biotin-Gln(Trt)-Gly-Pro-Trp(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Met-Asp(OtBu)-Phe-Linker-MBHAResin。 结构如下:
5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品Biotin-Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)
6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽等。
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