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Apamin是一种存在于apitoxin(蜂毒)中的18个氨基酸肽神经毒素，已被证明具有抗炎和抗纤维化的特性。它是一种高选择性的Ca2+激活的K+ (SK)通道的阻断剂，能够减少TGF-β1诱导的HSC-T6细胞中α-SMA的表达。

蜂毒明肽（Apamin）是在蜂毒素中发现的一种 18 个氨基酸的肽类神经毒素，它是蜂毒中各组份中最小的神经毒肽，占蜂毒干量的3%，具有复杂的双环结构，其中包括4个半胱氨酸残基和两个二硫键。

蜂毒明肽（Apamin）是一种 Ca2+ 激活的 K+ (SK) 通道的特异性和选择性的阻断剂，可透过血脑屏障，具有抗炎和抗纤维化的作用。

蜂毒明肽的来源
        蜂毒明肽来源于蜜蜂毒液。蜜蜂毒液是一种成分复杂的混合物，其中水分占80% - 88%，还含有若干种蛋白质多肽类、酶类、组织胺、酸类、氨基酸及微量元素等，蜂毒中的多肽类物质占蜂毒干重的70% - 80%，而蜂毒明肽就是其中一种重要的多肽成分 。

蜂毒明肽的结构特征
        一、氨基酸组成： 

         由18个氨基酸残基组成，具有旋转结构和α螺旋形态。

        二、二硫键：

        包含4个半胱氨酸残基，形成两个二硫键，呈现不对称的双环结构。

        三、电荷属性：

        带有正电荷，使其能够与带负电的细胞膜相互作用。

 
蜂毒明肽的应用领域
        一、皮肤病治疗

        蜂毒明肽因其抗炎和免疫调节作用，在治疗炎症性皮肤病（如痤疮、异位性皮炎、牛皮癣等）方面显示出巨大的潜力。通过抑制炎症细胞因子和趋化因子的生成，蜂毒明肽有助于减轻皮肤炎症反应。  

        二、神经退行性疾病

        在神经退行性疾病（如阿尔茨海默病和帕金森病）的治疗中，蜂毒明肽展示了积极的作用。通过减少神经炎症和促进神经保护，它能够在一定程度上延缓疾病的进程。  

        三、心血管疾病

        研究表明，蜂毒明肽在减轻由炎症引起的肝损伤和心血管疾病方面也具有积极作用。通过抑制氧化应激和炎症反应，蜂毒明肽有助于保护肝脏和心脏组织。  

        四、安全性和副作用

        尽管蜂毒明肽具有广泛的治疗潜力，但也存在一定的安全风险。大剂量使用可能导致不良反应，如疼痛和炎症。此外，某些成分（如PLA2）可能引发过敏反应。因此，在临床应用中需谨慎控制剂量，并对患者进行密切监测。

蜂毒明肽的作用
        一、对神经系统的作用：

        蜂毒明肽能阻断支配胃肠道平滑肌神经的抑制性冲动的传导，使胃肠平滑肌兴奋性增高，而呈收缩状态。它还可作用于脊髓的中间神经元、下行的网状脊髓束和前庭脊髓束，或大脑导水管周围中央灰质，影响动作的有机协同。

        二、强心、抗心律失常作用：

        蜂毒明肽具有很强的β-肾上腺素样作用，能够扩冠，增加心肌供血，使心肌收缩力明显增强，心率加快，心脏泵血功能增强，可用于治疗心衰。它还具有异丙肾上腺素样作用，且比异丙肾上腺素维持时间长（约10倍），抗心律失常。

        三、增加毛细血管的通透性，改善微循环：

        蜂毒明肽能够增加毛细血管的通透性，改善微循环。

        四、抗炎、调整免疫：

        蜂毒明肽直接升高血浆皮质醇或刺激垂体-肾上腺系统促进皮质激素的分泌，抑制5-羟色胺活性。

        五、营养修复肌营养不良细胞：

        强直肌肉中有蜂毒明肽受体，蜂毒明肽通过与其受体结合而发挥营养肌细胞达到治疗的作用。可用于治疗强直性脊柱炎、多发性硬化症。

最新研究
        最近的研究表明，蜂毒明肽被认为是小电导Ca2+激活的K+(small conductance Ca2activated potassium, SK)通道的特异性选择性阻滞剂，在帕金森病中其可通过阻断SK通道保护多巴胺能神经元免于变形。SK通道在动脉粥样硬化的发生中亦发挥着关键作用。

        有研究表明，蜂毒明肽可通过抑制核因子κB活化和降低细胞黏附分子-1水平来减轻动脉粥样硬化。Kim等发现蜂毒明肽可通过抑制核因子κB信号通路来减少IL-1β和IL-6的表达，进而激活淋巴迁移和角质形成，从而治疗炎症性皮肤病（如特应性皮炎）。此外，蜂毒明肽可以阻断电压依赖性K+通道，而电压依赖性K+通道是治疗过敏性哮喘的有效靶点。Ichinose等报告蜂毒明肽可以抑制肺组织中的组胺释放，减轻气道反应，其应用于过敏性哮喘治疗或可使患者获益。

二硫键广泛存在与蛋白结构中，对稳定蛋白结构具有非常重要的意义，二硫键一般是通过序列中的2个Cys的巯基，经氧化形成。
 

形成二硫键的方法很多：空气氧化法，DMSO氧化法，过氧化氢氧化法等。
 

二硫键的合成过程，  可以通过Ellman检测以及HPLC检测方法对其反应进程进行监测。  
   

如果多肽中只含有1对Cys，那二硫键的形成是简单的。多肽经固相或液相合成，然后在pH8-9的溶液中进行氧化。      
 

当需要形成2对或2对以上的二硫键时，合成过程则相对复杂。尽管二硫键的形成通常是在合成方案的最后阶段完成，但有时引入预先形成的二硫化物是有利于连合或延长肽链的。通常采用的巯基保护基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。我们分别列出两种以2-Cl树脂和Rink树脂为载体合成的多肽上多对二硫键形成路线：
 

二硫键反应条件选择    
 

 二硫键即为蛋白质或多肽分子中两个不同位点Cys的巯基（-SH）被氧化形成的S-S共价键。 一条肽链上不同位置的氨基酸之间形成的二硫键，可以将肽链折叠成特定的空间结构。多肽分 子通常分子量较大，空间结构复杂，结构中形成二硫键时要求两个半胱氨酸在空间距离上接近。 此外，多肽结构中还原态的巯基化学性质活泼，容易发生其他的副反应，而且肽链上其他侧链 也可能会发生一系列修饰，因此，肽链进行修饰所选取的氧化剂和氧化条件是反应的关键因素， 反应机理也比较复杂，既可能是自由基反应，也可能是离子反应。      

反应条件有多种选择，比如空气氧化，DMSO氧化等温和的氧化过程，也可以采用H2O2，I2， 汞盐等激烈的反应条件。
 

空气氧化法： 空气氧化法形成二硫键是多肽合成中最经典的方法，通常是将巯基处于还原态的多肽溶于水中，在近中性或弱碱性条件下（PH值6.5-10），反应24小时以上。为了降低分子之间二硫键形成的可能，该方法通常需要在低浓度条件下进行。
 

碘氧化法：将多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘进行氧化，反应15-40min。当肽链中含有对碘比较敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时，氧化条件要控制的更精确，氧化完后，立即加入维生素C或硫代硫酸钠除去过量的碘。 当序列中有两对或多对二硫键需要成环时，通常有两种情况：
 

自然随机成环:       序列中的Cys之间随机成环，与一对二硫键成环条件相似；
 

定点成环：       定点成环即序列中的Cys按照设计要求形成二硫键，反应过程相对复杂。在 固相合成多肽之前，需要提前设计几对二硫键形成的顺序和方法路线，选择不同的侧链 巯基保护基，利用其性质差异，分步氧化形成两对或多对二硫键。       通常采用的巯基保护 基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。