400-998-5282
专注多肽 服务科研
400-998-5282
专注多肽 服务科研
编号：197906
CAS号：154525-25-4;152175-68-3
单字母：H2N-NDDCELCVNVACTGCL-OH(Disulfide Bridge:C4-C12 & C7-C15)
| 编号: | 197906 |
| 中文名称: | Uroguanylin, human |
| 英文名: | Uroguanylin, human |
| 英文同义词: | Uroguanylin Topoisomer A (human), UGN Topoisomer A (human) |
| CAS号: | 154525-25-4;152175-68-3 |
| 单字母: | H2N-NDDCELCVNVACTGCL-OH(Disulfide Bridge:C4-C12 & C7-C15) |
| 三字母: | H2N-Asn-Asp-Asp-Cys-Glu-Leu-Cys-Val-Asn-Val-Ala-Cys-Thr-Gly-Cys-Leu-OH(Disulfide Bridge:Cys4-Cys12 & Cys7-Cys15) |
| 氨基酸个数: | 16 |
| 分子式: | C64H102N18O26S4 |
| 平均分子量: | 1667.86 |
| 精确分子量: | 1666.61 |
| 等电点(PI): | 8.35 |
| pH=7.0时的净电荷数: | 1.85 |
| 酸性基团个数: | pH=7.0时的净电荷数：-3.18 |
| 碱性基团个数: | 平均亲水性：亲水 |
| 平均亲水性: | -0.14 |
| 疏水性值: | 0.58 |
| 外观与性状: | 白色粉末状固体 |
| 消光系数: | - |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 纯度: | 95%、98% |
| 盐体系: | 可选TFA、HAc、HCl或其它 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 胃肠(Gastrointestinal)研究 二硫键环肽 |
| 参考文献（References）: | T. Kita et al., Am. J. Physiol., 266, F342 (1994) Rahbi H, Narayan H, Jones DJ, Ng LL. “The uroguanylin system and human disease”. Clinical Science. 123,12 (2012) |
尿鸟苷（人）含有二硫键的产物：Cys4-Cys12和Cys7-Cys15，可以三氟乙酸盐形式获得。尿鸟苷是一种肽类激素，参与调节体内液体和电解质平衡。它产生于肠道，特别是小肠和结肠的衬里。\nUroguanylin属于肽家族，包括鸟苷酸和热稳定肠毒素（STs）。这些肽都具有相似的结构和功能，因为它们结合并激活肠细胞中的鸟苷酸环化酶-C（GC-C）受体。\尿鸟苷酸对GC-C的激活导致环状GMP（cGMP）水平的增加，进而激活多种下游信号通路。这导致肠道中氯化物和碳酸氢盐分泌的增加，以及肠液分泌的增加。尿鸟苷还刺激肾脏对钠和水的重吸收，导致尿量增加。\已经研究了nUroguanylin的潜在治疗应用，特别是在治疗胃肠道疾病方面。例如，尿鸟苷的合成类似物正在开发中，作为便秘和其他肠道运动障碍的潜在治疗方法。此外，尿鸟苷酸已被证明具有抗炎特性，可用于治疗炎症性肠病。
Uroguanylin (Human) product containing the disulfide bonds: Cys4-Cys12 and Cys7-Cys15 and avaialable in the trifluoroacetate salt form. Uroguanylin is a peptide hormone that is involved in the regulation of fluid and electrolyte balance in the body. It is produced in the intestinal tract, specifically in the lining of the small intestine and colon.\nUroguanylin belongs to a family of peptides that includes guanylin and the heat-stable enterotoxins (STs).These peptides all share a similar structure and function, as they bind to and activate the guanylate cyclase-C (GC-C) receptor in intestinal cells.\nActivation of GC-C by uroguanylin leads to an increase in cyclic GMP (cGMP) levels, which in turn activates a variety of downstream signaling pathways. This leads to an increase in chloride and bicarbonate secretion in the intestine, as well as an increase in intestinal fluid secretion. Uroguanylin also stimulates sodium and water reabsorption in the kidneys, leading to an increase in urine output.\nUroguanylin has been studied for its potential therapeutic applications, particularly in the treatment of gastrointestinal disorders. For example, synthetic analogs of uroguanylin are being developed as potential treatments for constipation and other disorders of intestinal motility. Additionally, uroguanylin has been shown to have anti-inflammatory properties and may be useful in the treatment of inflammatory bowel disease.
尿鸟苷酸是一种由肠道细胞释放的肽。它与鸟苷酸环化酶受体结合，从而刺激环状GMP（cGMP）的产生。这导致肠道水和电解质分泌增加。尿鸟苷酸异构体A（人）是一种高纯度肽，可用作研究配体-受体相互作用的研究工具和离子通道抑制剂。
Uroguanylin is a peptide that is released by cells in the intestine. It binds to the guanylate cyclase receptor, which stimulates the production of cyclic GMP (cGMP). This leads to an increase in intestinal water and electrolyte secretion. Uroguanylin Isomer A (Human) is a high-purity peptide that can be used as a research tool for studying ligand-receptor interactions and as an inhibitor of ion channels.
尿鸟苷酸由十二指肠和近端小肠中的肠嗜铬细胞分泌。这种肽与食欲和饭后饱腹感有关。
Uroguanylin is secreted by enterochromaffin cells in the duodenum and proximal small intestine. The peptide is involved in appetite and perceptions of ‘fullness’ after eating meals.
用于胃肠道研究的多肽
胃肠疾病简介
胃肠道是人体最大的免疫器官。胃肠道是指从胃幽门到肛门的消化道，包括胃、小肠、大肠等部分。肠道是消化道最长的部分，也是其功能最重要的部分。胃肠道不是由肌肉和黏膜组成的简单管道，而是在复杂神经系统的神经支配下发挥作用的一个整体。胃肠道是消化系统的主要器官，它为身体吸收足够的水分和必需的营养物质。胃肠道疾病的种类和范围相当广泛。胃肠道疾病主要指一般炎症性胃肠道疾病（急慢性胃炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、急慢性阑尾炎等）、消化性溃疡、胃癌、食道癌、结直肠癌、肠易激综合征、细菌性痢疾、肠道梗阻、短肠综合征、大肠息肉、肛裂、肛瘘等。
胃肠疾病现状
据世界卫生组织称，胃肠道疾病对人类健康构成了巨大威胁。每年，全世界有超过 1000 万人死于胃肠道疾病。胃肠道疾病的特点是病程较长、治疗难度较大、反复发作。如今，胃肠道疾病的发病率很高。年龄越大，发病率越高，尤其是50岁以上的中老年患者。男性的发病率高于女性。胃肠道疾病如果不及时治疗，时间长了会反复发作，很容易转化为癌症。
胃肠道疾病的症状
症状可能因胃肠道疾病的位置和疾病的性质而异。胃肠道疾病的症状主要有食欲不振、恶心呕吐、腹痛、腹胀、腹泻、便秘等。胃肠道疾病也可能因出血、穿孔、梗阻和癌症而复杂化。
胃肠道疾病的原因
胃肠道疾病的病因是胃黏膜保护因子和攻击因子失衡，导致胃肠黏膜保护因子弱于攻击因子。生活中胃肠道疾病的发生通常与患者的心理因素、饮食、肠道感染、内脏胃肠动力变化、遗传因素和环境因素等有关。
胃肠道疾病的治疗
胃肠道黏膜中有几十个内分泌细胞，它们分泌的激素统称为胃肠激素。胃肠激素都是肽。构成肽链的氨基酸残基数量从几个到几十个不等。这些肽广泛分布于胃肠道黏膜和内在神经系统，对胃肠道平滑肌运动、黏膜腺体分泌、血液供应、局部炎症细胞、免疫活性细胞和细胞因子等具有重要的调节作用。
胃肠道研究的多肽汇总
1、胃动素
胃动素是小肠上部内分泌细胞分泌的一种22个氨基酸的肽，其主要生物学作用是参与消化间期和餐后胃肠运动的调节。近年来研究发现胃动素缺乏与功能性消化不良、肠易激综合征等胃肠道疾病的发生有关。
名称 CAS号 序列 编号
胃动素，犬 85490-53-5 FVPIFTHSELQKIREKERNKGQ 165195
胃动素（人、猪） 52906-92-0 FVPIFTYGELQRMQEKERNKGQ 191529
2、促胃动素
促胃动素是小肠上部内分泌细胞分泌的一种由22个氨基酸组成的肽，其主要生物学作用是参与消化间期和餐后胃肠运动的调节。近年来研究发现胃动素缺乏与功能性消化不良、肠易激综合征等胃肠道疾病的发生有关。
名称 CAS号 序列 编号
胃动素，犬 85490-53-5 FVPIFTHSELQKIREKERNKGQ 165195
促胃动素（人、猪） 52906-92-0 FVPIFTYGELQRMQEKERNKGQ 191529
3、胃泌素
胃泌素的主要功能是刺激胃酸分泌，促进胃肠蠕动，参与铁稳态的维持。同时，胃泌素还能刺激胰腺、胆汁和肠液的分泌，进一步分解小肠内的食物，有利于小肠对营养物质的吸收。
名称 CAS号 序列 编号
胃泌素 I（人类） 10047-33-3 Pyr-GPWLEEEEEEAYGWMDF-NH2 125058
[Leu15]-胃泌素 I（人） 39024-57-2 Pyr-GPWLEEEEEEAYGWLDF-NH2 194067
胃泌素 I (1-14)，人类 100940-57-6 Glp-GPWLEEEEEEAYGW 134023
CCK-4醋酸酯 35144-91-3 Trp-Met-Asp-Phe-NH2 111475
五胃泌素 5534-95-2 Boc-bAla-Trp-Met-Asp-Phe-NH2 132402
迷你胃泌素 I，人类 54405-27-5 LEEEEEAYGWMDF-NH2 136910
大胃泌素 1，人类 60675-77-6 Pyr-LGPQGPPXLVADPSKKQGPWLEEEEEEAYGWMDF-NH2 145590
胃泌素 I 大鼠 81123-06-0 Pyr-RPPMEEEEEAYGWMDF-NH2 180253
4、蟾蜍素
铃蟾肽是一种含有 14 个氨基酸残基的生物活性肽。铃蟾肽能刺激其他几种胃肠激素的释放，调节胃肠蠕动，刺激消化道正常粘膜组织的生长，提高致死性小肠结肠炎动物的存活率。
名称 CAS号 序列 编号
蟾蜍素 31362-50-2 Glp-QRLGNQWAVGHLM-NH2 165361
铃蟾肽九肽 55750-00-0 NQWAVGHLM 400427
5、速激肽
速激肽家族都是单链多肽，在羧基末端具有共同的氨基酸序列。速激肽能引起胃肠平滑肌强烈收缩，促进胃排空和肠内容物转运。目前已发现的速激肽包括P物质、神经肽A、神经肽B、神经肽K和神经肽γ。
名称 CAS号 序列 编号
皂甙 69-25-0 Pyr-PSKDAFIGLM-NH2 175600
肛褶蛙肽 63968-82-1 DVPKSDQFVGLM-NH2 128268
神经激肽A 86933-74-6 HKTDSFVGLM-NH2 147461
神经激肽 A (4-10) 97559-35-8 DSFVGLM-NH2 174006
神经激肽B 86933-75-7 DMHDFFVGLM-NH2 143980
物质 P (1-7) 68060-49-1 RPKPQQF 180316
6、生长抑素
生长抑素是一种含有14个氨基酸残基的环状多肽。生长抑素在调节多种内分泌和内分泌过程中起重要作用。生长抑素的主要作用是抑制胃酸分泌，减少胰腺的内分泌和外分泌。
奥曲肽是一种人工合成的8肽生长抑素类似物，其生理作用与生长抑素相似，半衰期为1-2小时。奥曲肽可抑制胃液和胰液的分泌，广泛用于消化道出血、急性胰腺炎、VIP瘤、胃泌素瘤等疾病的治疗。
名称 CAS号 序列 编号
奥曲肽 83150-76-9 DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-OL（二硫键：Cys2-Cys7） 198265
醋酸奥曲肽 79517-01-4 FC(1)FWKTC(1)T 198265
7、血管活性肠肽 (VIP) 及相关肽
血管活性肠肽（VIP）由28个氨基酸组成，主要由肠神经元释放。VIP在活体中具有双重作用，既作为胃肠激素又作为神经肽。作为一种神经肽，VIP的主要作用是扩张心脑血管，调节脑血流，降低肺动脉压，降低血压。VIP作为一种胃肠激素，在消化系统中的主要作用是抑制胃酸和胃蛋白酶的分泌，松弛肠道平滑肌，使食管下端括约肌、肠道平滑肌、肛门内括约肌松弛。因此，VIP水平的变化与胃肠道疾病密切相关，是胃肠道疾病研究的重要指标。
名称 CAS号 序列 编号
Prepro VIP (111-122)，人类 123025-94-5 VSSNISEDPPVPV 142625
Prepro VIP (81-122)，人类 111366-38-2 HADGVFTSDFSKLLGQLSAKKYLESLMGKRVSSNISEDPVPV 150156
VIP (6-28)（人、大鼠、猪、牛） 69698-54-0 FTDNYTRLRKQMAVKKYLNSILN-NH2 116303
[Dp-Cl-Phe6,Leu17]-VIP 102805-45-8 HSDAVXXDNYXRLRKQLAVKKYLNSXLN /
8、神经降压素
神经降压素是一种含有13个氨基酸残基的单链肽，由中枢神经系统和胃肠道合成和分泌，在脑和胃肠道中起着重要的协调作用。神经降压素可保护气道免受寒冷刺激引起的胃粘膜损伤，并可抑制胃酸分泌。神经降压素和其他神经肽参与肠道运动的调节。
名称 CAS号 序列 编号
神经降压素 (8-13) 60482-95-3 RRPYIL 145083
神经降压素 39379-15-2 Pyr-LYENKPRRPYIL 154570
[Gln4]-神经降压素 61445-54-3 XLYQNKPRRPYIL 198643
激动素 103131-69-7 IARRHPYFL 198975
爪蟾蛋白 51827-01-1 Pyr-GKRPWIL 164416
9、胆囊收缩素
胆囊收缩素(CCK)由小肠粘膜内壁I型分泌细胞分泌，其生理作用不仅是刺激胰液和胆汁的分泌，还可以调节胃肠动力。CCK的主要功能是减少食物摄入，抑制胃排空和胃酸分泌，刺激胆囊收缩和分泌胰腺消化酶。
名称 CAS号 序列 编号
CCK 八肽（非硫酸化） 25679-24-7 DYMGWMDF-NH2 195755
Gastrin (14-17) (human) 35144-91-3 Trp-Met-Asp-Phe-NH2 111475
10、胰泌素
分泌素是由27个氨基酸残基组成的肽类激素。分泌素几乎由所有肠内分泌细胞分泌，但主要由位于十二指肠粘膜的 S 细胞分泌。胰泌素的主要功能是抑制胃动力和胃酸分泌，并参与体内液体的平衡/渗透压调节。
名称 CAS号 序列 编号
促胰液素醋酸盐 10813-74-8 HSDGTFTSELSRLRDSARLQRLLQGLV-NH2 143392
分泌素（大鼠） 121028-49-7 HSDGTFTSELSRLQDSARLQRLLQGLV-NH2 150160
胰泌素 (28-54)，人 108153-74-8 HSDGTFTSELSRLREGARLQRLLQGLV-NH2 198686
分泌素，犬 110786-77-1 HSDGTFTSELSRLRESARLQRLLQGLV-NH2 200685
分泌素 (5-27)（猪） 19665-15-7 TFTSELSRLRDSARLQRLLQGLV-NH2 145730
11、胰多肽
胰多肽是由36个氨基酸组成的肽类激素，参与体内新陈代谢。胰多肽对胃肠道有广泛的作用，主要是抑制胃酸分泌和保护胃粘膜。
名称 CAS号 序列 编号
胰多肽，牛 179986-89-1 APLEPEYPGDNATPEQMAQYAAELRRYINMLTRPRY-NH2 200284
胰多肽，人 75976-10-2 APLEPVYPGDNATPEQMAQYAADLRRYINMLTRPRY-NH2 194468
胰多肽，大鼠 90419-12-8 APLEPMYPGDYATHEQRAQYETQLRRYINTLTRPRY-NH2 157282
12、肽YY
肽YY（PYY）是一种胃肠肽激素，主要由结肠和回肠粘膜的内分泌细胞分泌。YY肽的主要作用是减少食物摄入，减少胰腺外分泌，抑制胃肠蠕动和胃酸分泌。
名称 CAS号 序列 编号
肽YY (3-36) 126339-09-1 IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY-NH2 200293
肽YY(3-36)人 123583-37-9 IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY 198454
肽 YY，人类 118997-30-1 YPIKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY 132375
13、神经肽Y
神经肽Y是由36个氨基酸组成的肽类激素，结构中富含酪氨酸，属于胰多肽家族。神经肽Y释放后，主要通过神经肽Y受体发挥作用，影响摄食行为、激素分泌和胃肠功能。
名称 CAS号 序列 编号
神经肽 Y（人，大鼠） 90880-35-6 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH2 176022
神经肽 Y (13-36)，酰胺，人 122341-40-6 PAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH2 199416
神经肽Y 22-36 119019-65-7 SALRHYINLITRQRY-NH2 139969
神经肽 Y (29-64) 303052-45-1 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY 122423
神经肽 Y（游离酸）（人、大鼠） 99575-89-0 YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY 122423
14、阿片肽
阿片肽在 N 端共享一个共同的 5 个氨基酸序列。阿片肽可分为三类：脑啡肽、强啡肽和内啡肽。阿片肽可以调节胃肠蠕动。
名称 CAS号 序列 编号
[DAla2]-Leu-Enkephalin-Arg 81733-79-1 H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH 135373
强啡肽 A (1-13) 72957-38-1 YGGFLRRIRPKLK 116368
强啡肽 B 1-13 83335-41-5 YGGFLRRQFKVVT 117754
甲硫氨酸脑啡肽 58569-55-4 H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH 145193
N-乙酰-α-内啡肽 88264-63-5 Ac-YGGFMTSEKSQTPLVT 171588
β-内啡肽，大鼠 77367-63-6 YGGFMTSEKSQTPLVTLFKNAIIKNVHKKGQ 195443
β-酪啡肽，人类 102029-74-3 YPFVEPI 132731
β-酪啡肽 (1-3)，酰胺 80705-23-3 Tyr-Pro-Phe-NH2 167339
β-酪啡肽 (1-5)，酰胺，牛 83936-23-6 Tyr-d-Ala-Phe-Pro-Met 200643
β-酪啡肽 (1-6)，牛 77434-43-6 Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro 163513
β-酪啡肽 (1-7)，牛 72122-62-4 YPFPGPI 145444
α-新内啡肽 1-8 83339-89-3 YGGFLRKY 200655
β-新内啡肽 77739-21-0 YGGFLRKYP 117163
15、抑胃多肽
胃抑制多肽(GIP)是由43个氨基酸组成的线性多肽，由小肠黏膜K细胞产生。GIP的生理功能是抑制胃酸分泌，抑制胃蛋白酶分泌，刺激胰岛素释放，抑制胃蠕动和排空，刺激小肠液分泌，刺激胰高血糖素分泌。
名称 CAS号 序列 编号
GIP（人类） 100040-31-1 YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKGKKNDWKHNITQ 114120
GIP (1-39) 725474-97-5 YAEGTFISDYSIAMDKIRQQDFVNWLLAQKGKKSDWKHN 208477
二硫键广泛存在与蛋白结构中，对稳定蛋白结构具有非常重要的意义，二硫键一般是通过序列中的2个Cys的巯基，经氧化形成。
形成二硫键的方法很多：空气氧化法，DMSO氧化法，过氧化氢氧化法等。
二硫键的合成过程， 可以通过Ellman检测以及HPLC检测方法对其反应进程进行监测。
如果多肽中只含有1对Cys，那二硫键的形成是简单的。多肽经固相或液相合成，然后在pH8-9的溶液中进行氧化。
当需要形成2对或2对以上的二硫键时，合成过程则相对复杂。尽管二硫键的形成通常是在合成方案的最后阶段完成，但有时引入预先形成的二硫化物是有利于连合或延长肽链的。通常采用的巯基保护基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。我们分别列出两种以2-Cl树脂和Rink树脂为载体合成的多肽上多对二硫键形成路线：
二硫键反应条件选择
二硫键即为蛋白质或多肽分子中两个不同位点Cys的巯基（-SH）被氧化形成的S-S共价键。 一条肽链上不同位置的氨基酸之间形成的二硫键，可以将肽链折叠成特定的空间结构。多肽分 子通常分子量较大，空间结构复杂，结构中形成二硫键时要求两个半胱氨酸在空间距离上接近。 此外，多肽结构中还原态的巯基化学性质活泼，容易发生其他的副反应，而且肽链上其他侧链 也可能会发生一系列修饰，因此，肽链进行修饰所选取的氧化剂和氧化条件是反应的关键因素， 反应机理也比较复杂，既可能是自由基反应，也可能是离子反应。
反应条件有多种选择，比如空气氧化，DMSO氧化等温和的氧化过程，也可以采用H2O2，I2， 汞盐等激烈的反应条件。
空气氧化法： 空气氧化法形成二硫键是多肽合成中最经典的方法，通常是将巯基处于还原态的多肽溶于水中，在近中性或弱碱性条件下（PH值6.5-10），反应24小时以上。为了降低分子之间二硫键形成的可能，该方法通常需要在低浓度条件下进行。
碘氧化法：将多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘进行氧化，反应15-40min。当肽链中含有对碘比较敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时，氧化条件要控制的更精确，氧化完后，立即加入维生素C或硫代硫酸钠除去过量的碘。 当序列中有两对或多对二硫键需要成环时，通常有两种情况：
自然随机成环: 序列中的Cys之间随机成环，与一对二硫键成环条件相似；
定点成环： 定点成环即序列中的Cys按照设计要求形成二硫键，反应过程相对复杂。在 固相合成多肽之前，需要提前设计几对二硫键形成的顺序和方法路线，选择不同的侧链 巯基保护基，利用其性质差异，分步氧化形成两对或多对二硫键。 通常采用的巯基保护 基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。
多肽H2N-Asn-Asp-Asp-Cys-Glu-Leu-Cys-Val-Asn-Val-Ala-Cys-Thr-Gly-Cys-Leu-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取1.74g CTC Resin（如初始取代度约为0.89mmol/g）和1.86mmol Fmoc-Leu-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入4.65mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Leu-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Leu-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取4.65mmol Fmoc-Cys(Trt)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入9.29mmol DIPEA，4.41mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Asp(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Asn(Trt)-Asp(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(Trt)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Leu-CTC Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Asn-Asp-Asp-Cys-Glu-Leu-Cys-Val-Asn-Val-Ala-Cys-Thr-Gly-Cys-Leu-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。
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