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NTR 368 是衍生自 p75 神经营养蛋白受体 (p75NTR) 的一种肽，对应于人类受体的残基 368-381。在胶束脂质存在下，NTR 368 具有螺旋形成倾向。NTR 368 是神经细胞凋亡 (apoptosis) 的有效诱导剂。
NTR 368 is a peptide derived from p75 neurotrophin receptor (p75NTR) corresponding to residues 368-381 of the human receptor. NTR 368 has helix forming propensity in the presence of micellar lipid. NTR 368 is a potent inducer of neural apoptosis[1].

NTR368 是一种合成多肽，含有均衡的疏水与极性残基，有助于结构与相互作用研究。构象柔性支持蛋白质‑多肽界面建模。研究人员用其评估调控通路中的基序贡献。

NTR 368 is a synthetic peptide containing a balanced set of hydrophobic and polar residues that assist in structural and interaction studies. Conformational flexibility supports modeling of protein–peptide interfaces. Researchers use it to assess motif contributions within regulatory pathways.

M R Hileman, et al. A cytoplasmic peptide of the neurotrophin receptor p75NTR: induction of apoptosis and NMR determined helical conformation. FEBS Lett. 1997 Sep 29;415(2):145-54. : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9350985

多肽Ac-Ala-Thr-Leu-Asp-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg-Arg-Ile-Gln-NH2的合成步骤：

1、合成MBHA树脂：取若干克MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：

2、脱Fmoc：取2.26g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取2.03mmol Fmoc-Gln(Trt)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入4.07mmol DIPEA，1.93mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Thr(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

H2N-Thr(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ala-Thr(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Ala-Thr(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHA Resin，结构如下：

5、乙酸酐反应连接：在上述树脂中，加入适当DMF后，再加入2.03mmol乙酸酐到树脂中，再加入4.07mmol DIPEA，鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。 得到Ac-Ala-Thr(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Ile-Gln(Trt)-Linker-MBHAResin。 结构如下：

6、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品Ac-Ala-Thr-Leu-Asp-Ala-Leu-Leu-Ala-Ala-Leu-Arg-Arg-Ile-Gln-NH2。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

7、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

8、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。

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